科研 科研渊博 线粒体 线粒体自噬 因为一直有同学商酌猫诚笃对于线粒体自噬的问题，有一个比拟典型的问题等于到底是提总卵白已经线粒体卵白来检测，诚然猫诚笃作念过不啻一个札记，但在具体模子问题下，惟恐辰很难分析恶果。最初要强调的少量是人人要多看文件，但也不要尽信文件，生物九九归一是一个逻辑闭环，唯一前后逻辑能讲通就行。 有同常识如若想要领会绸缪卵白是否介导了经典自噬PINK1/Parkin所衔尾的线粒体自噬性爱镜头，要提线粒体卵白已经总卵白来检测。 最初这有两个可能性性爱镜头，一是PINK1/Parkin---绸缪卵白--线粒体自噬性爱镜头，二是绸缪卵白---PINK1/Parkin--线粒体自噬，我方要有一个粗糙的念念路细目，先拆解问题来分析，这两个通路的共同点在于绸缪卵白是否不错衔尾线粒体自噬这个表型，如若是这样不错过抒发或者敲低敲除绸缪卵白，先提一个总卵白检测，以2015年Nature上的著述为例（通信是线粒体限度宽裕大佬存在），这里需要证据一下，这篇著述第一张图线粒体自噬表型细目检测了TOM20/MTCO2的抒发以及mtDNA免疫染色（这个染色作念得很是一般）是否缺失，之是以作念得这样浅易在于一是作家作念的是明确的线粒体自噬模子，以及Parkin通路，而况是早年的著述。 而在2021年第四版自噬检测指南里指出线粒体自噬诚然莫得协调的检测圭臬，但线粒体自噬体的酿成是一个金圭臬般的存在，大大宗细胞组织中需检测LC3。而在模子有细胞或者组织彰着物化的时辰先检测总卵白，否则物化下许多卵白降解，索求线粒体卵白检测时线粒体卵白内参很难继承，可能皆会降解。一般来说唯一不是突出彰着的物化，总卵白内参已经比拟褂讪的。这个时辰还不错加相应的防止剂，比如说溶酶体防止剂，细刻下防止降解后，自噬体是不是会堆积，线粒体卵白降解是不是会还原，如若会即遍莫得索求线粒体卵白来检测亦然不错侧面反应的。 PINK1/Parkin检测时是索求总卵白已经线粒体卵白？ 文件上多种各样，有索求的线粒体卵白的有索求总卵白的。这两个卵白检测我冷落索求线粒体，一是两个卵白在许多组织细胞中本底抒发水平很低，PINK1自己定位在线粒体上，而在二者介导的线粒体自噬中，Parkin会转位至受损线粒体推崇功能，空间发生变化的卵白检测总卵白真谛不大，要否则就总卵白检测磷酸化的Parkin（可能更难检测）。香蕉鱼免费观看在线视频